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技術文章
導語：2004年沃特世推出了UPLC技術，這一技術基于小粒徑的分析方法，為使用者帶來了更高的分析效率和更好的數據質量。二十載光陰流轉，我們見證了這一技術從誕生到發展，再到如今革新的輝煌歷程。作為液相色譜領域的創新者，沃特世始終致力于推動技術的進步，堅持以用戶需求為導向，不斷追求更高的分析精度和可靠性。值此UPLC二十周年之際，謹以此推文向UPLC系列產品致敬，敬請期待新品上市。
生物分離分析領域的分析科學家經常面臨多種挑戰，如對復雜樣品中低豐度的蛋白質進行鑒定和定量。由于生物樣品數量有限，基質干擾強烈，為了在有限條件下實現更高靈敏度的分析，分析科學家們通常通過提高質譜儀的靈敏度、使用更細內徑的色譜柱、改造LC系統來改善LC/MS分析表現。常規LC系統改造策略，如進行管路改造或分流，雖然解決了LC系統的管路內徑較大易導致樣品擴散損失的問題，但往往會導致結果的重現性差，儀器性能不穩定，從而影響了分析的準確性和可靠性。為了解決以上難題，沃特世于2014年推出ACQUITY UPLC M-Class液相系統，致力于為分析科學家提供高靈敏、更可靠的實驗結果。
圖1. ACQUITY UPLC M-Class系統。
作為涵蓋納升級至微升級流速范圍的UltraPerformance LC(UPLC)超高效液相色譜系統，ACQUITY UPLC M-Class不僅提供了優異的UPLC分離性能，還兼容不同規格的色譜柱，流速范圍200 nL/min~100 μL/min，可靈活配置HDX技術、2D色譜和紫外檢測器，適用于不同領域的各類應用。作為質譜儀的前端接口，該系統與高分辨質譜聯用，能夠對復雜樣品進行深度分析表征和研究；而與四極桿質譜聯用，則適用于多肽、代謝物的定量分析或其他靶向性分析工作，如生物標記物的驗證等，其出色的靈敏度滿足了日益增長的分析需求，為科學家們解決復雜的分析難題提供了有力支持。
圖2. 采用ACQUITY UPLC M-Class系統的HDX-高分辨質譜儀平臺。
圖3. 左圖顯示了在線胃蛋白酶消化后鈣調蛋白肽段的色譜分離圖。右圖顯示了從10秒到240分鐘標記的肽段（ADIDGDGQVNY）的質譜結果。隨著在D2O中暴露時間延長，m/z值會隨之增加。
采用ACQUITY UPLC M-Class系統的HDX平臺可充分利用UPLC的分離能力，與高分辨質譜聯用實現對蛋白質構象的細微變化進行定量分析。HDX數據有助于監測蛋白質構象，定位結合位點和構象變化區域，為候選藥物與靶蛋白的結合、生物制藥產品開發、蛋白質間相互作用等研究提供信息。
圖4. ACQUITY UPLC M-Class系統與串聯四極桿聯用。
圖5. ionKey/MS系統iKey HSS T3, 100?, 1.8 µm, 150 µm×100 mm與ACQUITY UPLC 2.1 mm內徑色譜柱結果對比。與ACQUITY UPLC 2.1 mm內徑色譜柱相比，當注入相同體積時，使用ionKey/MS系統能夠使mafei的檢測靈敏度提高9倍。
微流級ACQUITY UPLC M-Class系統與使用ionKey技術的串聯四極桿聯用，有效提高了電噴霧質譜的電離效率，節約了流動相溶劑和樣品的制備成本，相比于常規的分析級LC-MS平臺能夠顯著提高生物制藥相關分析物（如肽、抗體、寡核苷酸）定量的靈敏度。
ACQUITY UPLC M-Class
發揮優異性能，為數據保駕護航
靈敏分析：內部流路全惰性系統材質和專為微升級分離而優化設計的新型微升級ESI質譜噴針、低擴散流通池等，顯著提高目標物的回收率，保持峰容量，保證了光學檢測的高分離度和靈敏度。
出色分離度：沃特世還推出了專為低擴散納流液相色譜系統而設計的Waters nanoEase M/Z納流和微流LC-MS色譜柱，通過ZenFit連接技術改善由連接變化引起的色譜表現不一致情況。這些分析柱充分利用了固定相亞2 µm顆粒技術的分離能力，適用于復雜肽和蛋白質納升級、毛細管級和微升級UPLC分離。
圖6. 具有ZenFit連接技術，適用于納升級到微升級LC-MS分析的沃特世色譜柱。
十年來，穩定可靠的納升至微升級ACQUITY UPLC M-Class分離系統以其性能和應用領域，為生物分離分析領域的研究人員提供了強大的支持，在蛋白質組學、代謝分析、代謝物鑒定和藥代動力學研究等領域均有廣泛應用。
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